Chromosomes et mitose - exercices On se propose de montrer quelques méthodes d'études des phases du cycle cellulaire et de mettre en évidence qu'il est soumis à un contrôle. Expérience 1 Des cellules animales sont mises en culture dans des boîtes de Pétri au fond desquelles elles adhèrent rapidement. Des mesures de croissance ont permis de déterminer un temps de génération de 14 heures. L'observation au microscope montre qu'à tout instant, 9,5 % des cellules sont en mitose. Celles-ci se répartissent en: prophase: 60% ⚫ métaphase: 15 % ⚫ anaphase: 5% télophase: 20%. 1. La culture est-elle synchrone ou asynchrone? Justifier la réponse. 2. Calculer la durée de la mitose et la durée de chacune de ses phases. Expérience 2 Les cellules d'une boîte de Pétri sont remises en suspension par un traitement bref à la trypsine qui permet de détacher les cellules qui adhèrent au fond de la boîte. Leur ADN est rendu fluorescent in situ par un colorant spécifique, de telle sorte que l'intensité de la fluorescence soit proportionnelle à la quantité d'ADN. Un grand nombre de ces cellules vont défiler devant le détecteur d'un cytomètre de flux qui mesure l'intensité de la fluorescence de chaque cellule et qui délivre la courbe de distribution des teneurs en ADN cellulaire dans la population. Cette courbe met en évidence trois catégories cellulaires différentes, A, B et C. Nombre de cellules Les cellules du pic A représentent A 43 % de la population et celles du pic C représentent 29%. B C QADN/cellules 2 3. Indiquer à quels stades cellulaires sont les cellules de chaque pic A et B et les cellules de B. 4. A l'aide des % de cellules dans les populations A, B et C, estimer la durée de chaque phase du cycle cellulaire. Expérience 3 Il est possible de réaliser la fusion de deux cellules qui sont à des stades différents du cycle cellulaire : on obtient alors un hétérocaryon (cellule contenant deux noyaux différents) avec mise en commun des cytoplasmes. Ce modèle expérimental permet de savoir si une cellule donnée contient un facteur de stimulation d'une étape du cycle. Les résultats de 3 expériences de fusion sont présentés figure 3 ci- contre. A 5. Indiquer à quels stades du cycle cellulaire étaient les cellules fusionnées. 6. Interpréter les résultats obtenus. B 1 ​